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实用!郭春和博士教你如何防控和净化猪蓝耳病

05-31 17:36 《猪业》2021年02期

猪蓝耳病防控与净化技术方案

郭春和,刘小红,陈瑶生

中山大学生命科学学院

一、背景知识

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是养猪业中最重要的传染病之一,其致病机理仍不完全清楚。其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV),主要感染猪肺泡巨噬细胞,破坏免疫系统。该病毒具有以下特点:极易变异重组、免疫抑制性、产生中和抗体慢、病毒血症时间长,类似HIV。且目前疫苗存在安全性不好、不同毒株交叉保护力差、疫苗毒带毒时间长、毒力返强、与田间毒株重组、疫苗毒株种类繁多、业界争议大等问题。因此,PRRS防控任重而道远,不能简单地依靠疫苗,需采取综合防控的措施。

二、国内外PRRS疫苗统计

1.国内疫苗统计

2.国外疫苗统计

目前我国蓝耳苗毒株有9个,生产厂家30多家,市场上PRRS疫苗仍以活苗为主,国外使用的都是活苗。灭活苗国内外专家早已证实效果不理想或无效,且活苗只对同源毒株有一定保护力,对异源毒株无保护力或保护力差。

三、PRRS净化是种猪场的必由之路

1. PRRS净化原则

1)一般情况下,种猪场不打蓝耳苗。只有出现蓝耳感染导致猪群不稳定,才免疫蓝耳苗,后期通过疫苗免疫后,猪群稳定,应停止使用疫苗。

2)在疫苗使用过程中,坚持只用一种蓝耳苗毒株,且使用活苗,当猪群有波动不稳定时,也不应该更换蓝耳苗毒株,目的使猪场内部只有一种疫苗毒株。

3)蓝耳抗原监测过程中,一旦有阳性,必需测序,鉴别野毒、疫苗毒,野毒感染猪只必须淘汰,抗原检测采用荧光定量RT-PCR。

4)当使用疫苗后,定期监测半年后,基本无野毒感染,且猪群稳定,可考虑停止打苗,改用血清驯化。

5)在蓝耳净化过程中,由于母猪未打蓝耳苗,保育育肥阶段无抗体,容易出现蓝耳隐性感染猪只发病、蓝耳爆发,需特别注意该阶段蓝耳的监测,并配合保健方案。蓝耳阳性血清保存,以备后续血清驯化用。

6)基于蓝耳苗带毒时间长,在打蓝耳苗过程中,即使普免(一刀切),也要避开怀孕期母猪。

7)蓝耳净化成功后,产房仔猪蓝耳抗原抗体双阴性,生物安全需特别重视。在驯化后产生第一批蓝耳双阴性仔猪进入保育舍前,需对保育舍全部清群并彻底消毒。

8)在使用血清驯化前,一定要严格检测血清不带有非洲猪瘟、伪狂野毒、圆环、 猪瘟等病毒,防止疾病传播。

2. PRRS净化目的

一是在猪群中建立本猪场蓝耳毒株的优势生态种群,净化野毒;二是后备猪同时感染同时消失,使后备猪同时接触本场蓝耳毒株,猪体内蓝耳病毒几乎同时消失;三是使后备猪接触本场蓝耳毒株,激活免疫系统,防止后期感染;四是使本猪场猪群健康水平稳定,提高生产成绩;五是一旦猪场健康稳定,停止使用蓝耳苗;六是没有易感动物存留以使病毒延续。

3. 种公猪

种公猪不打蓝耳苗,做好生物安全。若公猪之前有打蓝耳苗,而且猪群稳定,可慢慢减少免疫次数(公猪一般普免),直至不打蓝耳苗。种公猪必须实施头头检验,保证蓝耳病抗原阴性并直至抗原抗体双阴性。种公猪站最好远离母猪场,采有高效空气过滤公猪舍,人员管理与母猪场相对分开。

4. 种母猪(含后备母猪)

引种是PRRS防控的重中之重。首先根据不同母猪场规模大小,一次性准备6个月的后备母猪进群。然后实施封群驯化(包括血清驯化和疫苗驯化)。

血清驯化:通过驯化前期工作,掌握本场蓝耳流行毒株,采集本场经抗原检测蓝耳阳性猪只血清,定量分析,根据定量结果用PBS或生理盐水稀释(通常1:100),制备好驯化用血清后1 ml接种后备猪(接种前一天注射长效抗生素,或通过饲料提前一周抗生素保健);封群6个月,接种后7天定期观察猪只精神状态、有无发热等症状,多维饮水保健,6个月内禁止引入其他猪只;对于寻找蓝耳抗原阳性猪只平时多留意发热育肥猪和保育猪,有疑似蓝耳症状采血检测以备驯化用。

疫苗驯化:当该猪场第一次做蓝耳净化,而且一直有打蓝耳苗时,建议使用疫苗驯化。后期猪场稳定后,可改用血清驯化。疫苗驯化步骤与血清驯化相同。

5. PRRS净化过程中产房仔猪监测

由于产房仔猪采血应激大,唾液不好采。可收集阉公睾丸液和断尾液体(图1),检测蓝耳抗原及其他病原,监测是否有母猪垂直传播感染。

图1 阉割睾丸和断尾液体

6. PRRS净化过程中保育监测

在血清(或疫苗)驯化的2-4个月内每周要多配10%-30%的母猪(根据实际影响调整)。驯化后12周开始检测断奶仔猪,连续测8周(5000头母猪场,一周240窝,2400-2500头仔猪,测30窝,每窝2头,共60头仔猪的检测量),如果批批阴性,那么证明母猪群已经稳定,产出阴性仔猪。配合实施保育舍清群。母猪群继续封群至200天,此时母猪群就完全净化了蓝耳病。

保育舍清群要点:

一是清空保育阶段的猪群,旨在把易感动物全部清走;

二是按照相关标准规范,消灭环境中的病原体:清扫猪舍一定要高标准严要求,做好有机物的清除和猪舍的消毒工作。建议:在喷消毒剂前,先用70~80℃的热水进行清洗,中间要进行一次熏蒸消毒。

三是空栏时间要足够长,2周左右,最低不少于10天。依据季节和当地的气候进行相应调整,特别是潮湿寒冷的季节要延长空栏时间。

7. PRRS净化过程中育肥监测

定期在保育中期和育肥中期采集唾液或血清检测蓝耳病毒,阳性样品测序鉴定是野毒还是疫苗毒。整个猪场,所有蓝耳阳性血清都要保存于-80度冰箱,以备后续血清驯化用。

8. PRRS净化总体技术路线

四、PRRS防控前瞻性研究

前面讲到PRRSV 疫苗效果不理想。基于病毒摧毁免疫系统,类似HIV,很难开发出安全性好、免疫效果好的疫苗。因此,通过抗病育种的方式培育抗病猪新品系可能是未来防控PRRS的重要方向。2021中央一号文件指出,尊重科学,严格监管,有序推进生物育种产业化应用,加强育种领域知识产权保护。提示培育抗PRRSV基因编辑猪具有潜在的应用价值。

本人及所在团队通过与河南牧原食品股份有限公司、广东壹号食品合作,培育出CD163-LBP缺失、抵抗高致病性PRRSV毒株感染的基因编辑猪(图2、3)。该编辑猪是目前对CD163基因片段删除最少的,以最大限度地保留其生物学功能,相当于对其做了一个最小的手术。目前生长良好,正在进行经济性状、免疫性状、生物安全、育种价值等分析和评估,以期培育抗病猪新品系并产业化应用,使猪天然抵抗PRRSV感染,无需接种疫苗和使用药物,真正做到从根本上解决PRRSV对生猪养殖的影响。

图2 CD163-LBP基因编辑两广小耳花猪和大白猪

图3 CD163-LBP基因编辑猪抵抗高致病毒株JXA1感染

作者简介

郭春和,中山大学特聘研究员,致力于PRRSV研究。主持国家自然面上项目(2项)、青年项目(1项)、广东省基金重点项目(2项)等10项课题,以第一或独立通讯作者在PLoS PathogensJournal of Virology等期刊发表16SCI,以第一发明人(或导师第一本人第二)获授权国家发明专利9项(转让1项),获全面百名优秀博士后等奖项。

来源:《猪业》2021年02期

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